作者：
發布時間：
2025
-
08
-
13
點擊次數：
0
土壤氨基糖是指一類含有氨基和羥基的糖類化合物，主要來源于微生物細胞壁的殘留以及微生物代謝產物。它們是土壤有機質的重要組成部分，具有較高的穩定性和微生物異源性，在土壤中能夠長期保存。土壤氨基糖不僅是評估微生物對土壤有機碳、氮貢獻的重要指標，還能通過不同組分的比值反映微生物群落組成的變化。常見的土壤氨基糖包括氨基葡萄糖、氨基半乳糖、氨基甘露糖和胞壁酸等，它們在土壤生態系統的物質循環和結構穩定中發揮著關鍵作用。土壤氨基糖來源：微生物合成：大部分來源于微生物殘體（真菌/細菌生物量）植物輸入：少量來自植物根系分泌物有機質轉化：腐殖質結合態氨基糖（與鐵鋁氧化物共沉淀）實驗方法氣相色串聯質譜01稱取約0.5~1.0g的土樣于水解管中，沿管壁加入5 mL 6 mol/L鹽酸，用氮氣置換水解管中空氣2min后密封。在烘箱中105℃放置8h水解。02待水解液冷卻至室溫后，加入250μg肌醇。渦旋儀震蕩30s混勻。取水解液于5mL離心管中，于8000rpm離心1min。取上清液1mL于50mL離心管中用氮氣于吹干。用20mL純水溶解殘渣。用0.4mol/LKOH 0.01mol/LHCL調節pH至6.6~6.8。離心管以4000rpm離心10min，轉移出上清液于100mL茄型瓶中，于65℃，25rpm旋轉蒸發至干。再加入10mL無水甲醇溶解瓶中殘渣。后轉移至另一50mL離心管。氮吹至5mL左右，渦旋溶解管壁有機物后，以4000rpm離心10min，除鹽。再將上清液轉移到5mL衍生瓶中吹干。并加入100μg戊五醇1mL水，凍干。03 標準樣品制備：同時準備3個標準樣品。另取衍生瓶中加入100μL混標（1mg/mL的氨基葡萄糖、氨基半乳糖、0.5mg/mL氨基甘露糖，0.25mg/mL胞壁酸），50μg肌醇，100μg戊五醇，輕輕搖勻后，與樣品衍生瓶一起凍干。04衍生：a) 向吹干的樣品和標準樣品的衍生瓶中加入300μL衍生試劑后蓋緊。渦旋30s混勻。b) 在80℃水浴35min，每5min震蕩一次。冷卻后加入1mL醋酐，渦旋30s混勻，在80℃水浴25min，每5min震蕩一次。衍生管冷卻后加入1.5mL二氯甲烷，渦旋30s混勻。c) 往衍生管中加入1mL1mol/LHCL加蓋密封后渦旋30s。靜置分層后吸出上層無機相。d) 改加1mL純水，重復上述步驟3次。最后一次盡量吸出無機相。e) 剩余有機相于45℃下氮吹干。溶解到400μL稀釋劑中，然后轉移到帶內插管進樣瓶中待測。圖譜、計算 標準圖譜： 校正因子計算： 結果計算：