實驗材料：
植物樣：青稞種子
實驗步驟：
準確稱取0.5g經研磨的樣本，放在100ml的燒杯中，先以少量蒸餾水調成糊狀，然后加50ml蒸餾水，攪勻，置于50℃恒溫水浴中保溫20min，使還原糖浸出。離心或過濾，用20ml蒸餾水洗殘渣，再離心或過濾，將兩次離心的上清液或濾液全部收集在100ml的容量瓶中，用蒸餾水定容至刻度，混勻，作為還原糖待測液。
取7支具有25ml刻度的血糖管或刻度試管，編號，按比例精確加入濃度為1mg/ml的葡萄糖標準液和3,5-二硝基水楊酸試劑。將各管搖勻，在沸水浴中加熱5min，取出后立即放入盛有冷水的燒杯中冷卻至室溫，再以蒸餾水定容至25ml刻度處，用橡皮塞塞住管口，顛倒混勻（如用大試管，則向每管加入21.5ml蒸餾水，混勻）。在540nm波長下，用0號管調零，分別讀取1～6號管的消光值。以消光值為縱坐標，葡萄糖mg為橫坐標，繪制標準曲線，求得直線方程。
取3支25ml刻度試管，編號，分別加入還原糖待測液2ml，3,5-二硝基水楊酸試劑1.5ml，其余操作均與制作標準曲線相同，測定各管的吸光值。
分別在標準曲線上查出相應還原糖mg數，計算還原糖百分含量。
1、DNS法
測各種還原糖標準曲線原理:3,5-二硝基水楊酸(3,5-dinitrosalicylic acid, DNS)在堿性條件下與還原糖的還原末端反應生成橙黃至棕紅色的氨基化合物，在一定范圍內，還原糖的量和反應液的顏色強度呈正比例關系。
??引伸：植物還原糖檢測試劑盒是還原糖在堿性條件下被氧化成糖酸，3,5-二硝基水楊酸被還原為棕紅色的氨基化合物。在一定范圍內，還原糖的量與棕紅色產物的顏色深淺程度呈一定比例關系。測定棕紅色物質的吸光度，該吸光度值與還原糖含量呈線性關系，利用比色法和標準曲線測得樣品中的還原糖的含量。
2、鐵氰化鉀法
根據蔗糖的非還原性，用生成物（葡萄糖和果糖）能夠還原菲林溶液中的銅，再根據生成的氧化亞銅的量求出糖的含量。先制備還原糖待測混合液，通過0.1N的硫代硫酸鈉滴定，達到當量點前，注入淀粉指示劑滴定至藍色消失。土壤的轉化酶活性，以單位土重的0.1N硫代硫酸鈉毫升數（對照與試驗測定的差）表示。
測各種還原糖標準曲線原理:鐵氰化鉀[K3Fe(CN)6〕本身為黃色(吸收峰在420nm)左右，而與還原糖反應可生成無色的亞鐵氰化鉀[K4?Fe( CN)6?]，在一定范圍內，還原糖的量和反應液的顏色強度呈反比例關系。
????討論：該法是還原糖檢測的經典方法，鐵氰化鉀本身為黃色，與還原糖反應后生成無色的亞鐵氰化鉀。
3、MBTH法
測各種還原糖標準曲線原理:MBTH(3-甲基-2-苯并噻唑酮腙,3-methyl-2-benzothiazolinone hydrozone)首先與還原糖反應生成嗪，過量的MBTH被Fe+3氧化成陽離子，再與嗪反應生成青藍色化合物，在一定范圍內，還原糖的量和反應液的顏色強度呈正比例關系。
??討論：該法為還原糖測定的新方法。在氧化反應過程中MBTH 失去兩個電子和一個質子，形成了親電子中間體，這一中間體被假設是具有活性的耦合化合物，中間體再與嗪反應。
總結：
比較三種方法測還原糖的精密度和回收率，MBTH法的靈敏度最高，鐵氰化鉀法次之，DNS法的靈敏度最低。MBTH法靈敏度高，測定不受蛋白質、醋酸鹽和琥珀酸鹽緩沖液的干擾，對于不同聚合度的同類還原糖，其還原端的顯色吸光系數基本相同，通過實驗證明，它特別適合于多糖水解酶的低酶活測定或DON酶聯免疫加標測定；DNS法雖然操作穩定，精密度高，但此法靈敏度相對較低，用此法測定微量多糖水解酶，如飼料添加劑中木聚糖酶活力時，則無法準確測定；
鐵氰化鉀法靈敏度高于DNS法，但也存在諸多弊端，如該法為逆向顯色，還原糖濃度控制稍有不當或過量，即得不到任何結果。