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2025
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土壤氨基糖是指一類含有氨基和羥基的糖類化合物，主要來源于微生物細(xì)胞壁的殘留以及微生物代謝產(chǎn)物。它們是土壤有機(jī)質(zhì)的重要組成部分，具有較高的穩(wěn)定性和微生物異源性，在土壤中能夠長期保存。土壤氨基糖不僅是評估微生物對土壤有機(jī)碳、氮貢獻(xiàn)的重要指標(biāo)，還能通過不同組分的比值反映微生物群落組成的變化。常見的土壤氨基糖包括氨基葡萄糖、氨基半乳糖、氨基甘露糖和胞壁酸等，它們在土壤生態(tài)系統(tǒng)的物質(zhì)循環(huán)和結(jié)構(gòu)穩(wěn)定中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。土壤氨基糖來源：微生物合成：大部分來源于微生物殘?bào)w（真菌/細(xì)菌生物量）植物輸入：少量來自植物根系分泌物有機(jī)質(zhì)轉(zhuǎn)化：腐殖質(zhì)結(jié)合態(tài)氨基糖（與鐵鋁氧化物共沉淀）實(shí)驗(yàn)方法氣相色串聯(lián)質(zhì)譜01稱取約0.5~1.0g的土樣于水解管中，沿管壁加入5 mL 6 mol/L鹽酸，用氮?dú)庵脫Q水解管中空氣2min后密封。在烘箱中105℃放置8h水解。02待水解液冷卻至室溫后，加入250μg肌醇。渦旋儀震蕩30s混勻。取水解液于5mL離心管中，于8000rpm離心1min。取上清液1mL于50mL離心管中用氮?dú)庥诖蹈伞Ｓ?0mL純水溶解殘?jiān)Ｓ?.4mol/LKOH 0.01mol/LHCL調(diào)節(jié)pH至6.6~6.8。離心管以4000rpm離心10min，轉(zhuǎn)移出上清液于100mL茄型瓶中，于65℃，25rpm旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干。再加入10mL無水甲醇溶解瓶中殘?jiān)：筠D(zhuǎn)移至另一50mL離心管。氮吹至5mL左右，渦旋溶解管壁有機(jī)物后，以4000rpm離心10min，除鹽。再將上清液轉(zhuǎn)移到5mL衍生瓶中吹干。并加入100μg戊五醇1mL水，凍干。03 標(biāo)準(zhǔn)樣品制備：同時(shí)準(zhǔn)備3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品。另取衍生瓶中加入100μL混標(biāo)（1mg/mL的氨基葡萄糖、氨基半乳糖、0.5mg/mL氨基甘露糖，0.25mg/mL胞壁酸），50μg肌醇，100μg戊五醇，輕輕搖勻后，與樣品衍生瓶一起凍干。04衍生：a) 向吹干的樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品的衍生瓶中加入300μL衍生試劑后蓋緊。渦旋30s混勻。b) 在80℃水浴35min，每5min震蕩一次。冷卻后加入1mL醋酐，渦旋30s混勻，在80℃水浴25min，每5min震蕩一次。衍生管冷卻后加入1.5mL二氯甲烷，渦旋30s混勻。c) 往衍生管中加入1mL1mol/LHCL加蓋密封后渦旋30s。靜置分層后吸出上層無機(jī)相。d) 改加1mL純水，重復(fù)上述步驟3次。最后一次盡量吸出無機(jī)相。e) 剩余有機(jī)相于45℃下氮吹干。溶解到400μL稀釋劑中，然后轉(zhuǎn)移到帶內(nèi)插管進(jìn)樣瓶中待測。圖譜、計(jì)算 標(biāo)準(zhǔn)圖譜： 校正因子計(jì)算： 結(jié)果計(jì)算：